FLT3-ITD 基因是 FLT3 基因的一種突變形式，屬于 FMS 樣酪氨酸激酶家族，位于人類 13 號染色體長臂（13q22.2）。該基因編碼的蛋白是一種跨膜受體蛋白，屬于 III 型受體酪 氨酸激酶（RTK）家族成員，在造血細胞的生長、增殖和分化中發(fā)揮關鍵作用。

      FLT3-ITD 突變是 FLT3 基因近膜結構域的內部串聯(lián)重復，通常發(fā)生在 14/15 號外顯子 上，插入的重復序列長度一般 3-400 bp 不等，且總是以三倍的倍數(shù)出現(xiàn)，保留轉錄本的閱讀框。這種突變導致 FLT3 蛋白在無配體結合的情況下發(fā)生二聚體化并持續(xù)自我磷酸化， 增強激活酪氨酸激酶活性，使得下游信號通路（如 RAS/MAPK、PI3K/AKT 等）持續(xù)激活， 導致細胞增殖失調。

      BaF3（小鼠原 B 細胞）的生長和增殖需要 IL-3 的維持。通過引入各種表達激酶的基因， 能作為 BaF3 的驅動基因，讓 BaF3 不再依賴 IL-3 而增殖，進而激酶基因成為 BaF3 增殖依 賴的驅動基因，用于評估小分子藥物對激酶的靶向抑制作用，原理及流程見下圖所示。
 

Figure 1. FLT3-ITD[Y842C] BaF3 細胞的構建原理圖

1.WB of FLT3-ITD [Y842C]/BaF3

Figure 1. WB of FLT3-ITD [Y842C]/BaF3.

2. Sanger of FLT3-ITD [Y842C]/BaF3


Figure 3. Sanger of FLT3-ITD [Y842C]/BaF3.
 

3. Anti-proliferation assay

Figure 4. CTG Proliferation Assay of FLT3-ITD [Y842C] BaF3 (C9).